Penelitian bertujuan untuk mengetahui pengaruh detergen, bayclean dan air biasa tanpa bahan campuran terhadap benih mentimun pada beberapa masak fisiologis. Penelitian dilaksanakan di PT. Benih Citra Asia Desa Penanggungan Wirowongso Ajung Kabupaten Jember dengan ketinggian + 200 mdpl, pada Desember 2012 sampai Januari 2013. Metode penelitian dilaksanakan dengan menggunakan Rancangan Acak Kelompok (RAK) Faktorial dengan dua faktor dan diulang empat kali. Hasil penelitian menunjukkan bahwa tingkat kemasakan yang berbeda memberikan pengaruh yang nyata terhadap parameter bobot 1000 butir. Metode ekstraksi yang berbeda berpengaruh nyata terhadap kadar air, kemurnian benih, vigor kecepatan kecambah benih, daya kecambah benih dan berat 1000 butir benih. Interaksi antara tingkat kemasakan dan metode ekstraksi berpengaruh nyata terhadap daya kecambah benih dan berat 1000 butir benih, dengan kombinasi perlakuan buah lewat masak fisiologis, benih diekstrak, difermentasi, kemudian dicuci menggunakan air biasa, setelah itu dijemur ± 3 hari cenderung memberikan daya berkecambah benih yang terbaik dan kombinasi perlakuan buah masak fisiologis, benih diekstrak, difermentasi, kemudian dicuci menggunakan air biasa, setelah itu dijemur ± 3 hari cenderung memberikan berat 1000 butir benih yang terbaik.