Penyakit antraknosa merupakan penyakit utama yang menyebabkan kerugian secara ekonomi pada tanaman cabai merah. Penggunaan ekstrak tembakau merupakan salah satu alternatif untuk mengendalikan penyakit antraknosa yang disebabkan jamur Colletotrichum sp. Tujuan penelitian antara lain: 1). Untuk mengetahui konsentrasi yang tepat dalam menghambat pertumbuhan koloni jamur Colletotrichum sp secara in vitro., dan 2). Untuk mengetahui konsentrasi yang tepat dalam menghambat penyakit antraknosa pada buah cabai merah. Konsentrasi ekstrak tembakau yang diuji adalah 25%, 50%, 75%, 100% dan kontrol sebagai pembanding. Hasil penelitian menunjukan bahwa: Konsentrasi ekstrak tembakau yang efektif dalam menghambat pertumbuhan jamur Colletotrichum sp secara in vitro adalah konsentasi 100% dengan daya hambat paling tinggi sebesar 33,78 % dan dapat menekan pertumbuhan spora jamur Colletotrichum sp. Konsentrasi ekstrak tembakau yang efektif dalam menghambat penyakit antraknosa pada buah cabai merah adalah 100% dan 75%, kedua perlakuan tersebut belum terserang penyakit antraknosa setelah diinkubasi selama 7 hari dan untuk menghambat masa inkubasi yang efektif adalah konsentrasi 100% dengan masa inkubasi paling lama yaitu 13 hari.