Penyakit busuk batang pada tanaman jagung yang disebabkan oleh Fusarium verticillioides
merupakan salah satu kendala budidaya yang cukup serius, mengingat patogen ini juga mampu
menghasilkan mikotoksin yang membahayakan kesehatan manusia dan ternak. Pemanfaatan
bakteri rhizosfer sebagai agen pengendali hayati dipandang sebagai alternatif yang lebih aman dan
berkelanjutan dibandingkan penggunaan fungisida sintetis. Penelitian ini bertujuan mengevaluasi
kemampuan antagonis isolat bakteri asal rhizosfer mentimun (Cucumis sativus L.) terhadap
Fusarium verticillioides secara in vitro dan menentukan isolat yang paling efektif. Empat isolat
bakteri (B1–B4) diperoleh dari tanah rhizosfer mentimun sehat di Desa Umbulsari, Kabupaten
Jember, kemudian diuji potensi antagonismenya menggunakan metode kultur ganda (dual culture)
serta dikarakterisasi berdasarkan sifat morfologi, fisiologi, dan biokimia. Data daya hambat
dianalisis secara deskriptif dan diuji lanjut dengan uji nonparametrik Friedman. Hasil penelitian
menunjukkan bahwa keempat isolat bersifat antagonis terhadap Fusarium verticillioides, dengan
isolat B1 memberikan daya hambat tertinggi sebesar 47,47%, diikuti B2 (37,74%), B3 (25,35%),
dan B4 (20,65%). Seluruh isolat bercirikan gram positif, katalase positif, oksidase negatif, reaksi
oksidatif–fermentatif negatif, serta mampu bertahan pada variasi suhu, pH, dan salinitas yang
cukup luas, meskipun tidak menunjukkan zona bening pada uji kitinase sehingga aktivitas
kitinolitiknya tidak terdeteksi secara kualitatif. Berdasarkan karakter tersebut, keempat isolat
diduga tergolong genus Bacillus sp. dan berpotensi dikembangkan lebih lanjut sebagai agen hayati
ramah lingkungan untuk mengendalikan penyakit busuk batang pada tanaman jagung.